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    你知不知道裂解液的成分也會影響自動核酸提取儀的提取效率

    發布時間:2022-03-08瀏覽:8次
      自動核酸提取儀是應用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸提取工作的儀器。廣泛應用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫學鑒定、環境微生物檢測、食品安全檢測、畜牧業和分子生物學研究等多種領域。
     
      離心柱法核酸提取儀主要采用離心機和自動移液裝置相結合的方法,通量一般在1-12個樣本,操作時間和手工提取差不多,并不能提高實際工作效率,且價格昂貴,不同型號儀器的耗材也不能通用,僅適合經費充足的大型實驗室使用。
     
      洗脫是解離吸附在磁珠上的DNA,得到純度和濃度均很高的DNA,直接影響核酸得率,影響自動核酸提取儀洗脫效率的因素有磁珠的干燥程度以及洗脫溫度和時間。
     
      一般核酸提取的主要步驟分為四步:裂解、吸附、洗滌和洗脫,每一步出現問題都會影響磁珠的提取效率,樣本裂解是裂解細胞或病原體,釋放里面的核酸。影響裂解的主要因素有裂解液的成分及裂解的溫度和時間。
     
      1、裂解溫度和時間:提高溫度和增加裂解時間可以讓細胞裂解更徹底,得到更多核酸,需要摸索合適的溫度和時間;溫度過高或時間過長,也有可能導致核酸斷裂或醇類揮發導致的提取效率下降。
     
      2、裂解液成分:對于一些難裂解的樣本,可以通過提高胍鹽濃度以及表面活性劑濃度來增強裂解液的裂解能力。
     
      3、吸附是磁珠吸附核酸的能力,影響吸附能力的有磁珠的吸附能力以及結合緩沖液的結合能力。磁珠吸附能力受到磁珠比表面積以及修飾基團的密度影響??筛鶕嶋H樣本選擇磁珠粒徑和修飾基團。

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